細胞健康分析試劑、試劑盒和工具可用于測量細胞培養(yǎng)活力的一般和特異性指標(biāo)。其中,活力檢測可用作測量細胞健康的一般指標(biāo),或與細胞毒性檢測一起用于評估處理條件的影響。增殖檢測通常使用DNA合成和細胞分裂作為特定條件或處理下細胞代謝活性的測量指標(biāo)。細胞毒性試劑盒可采用生物還原讀數(shù)來評估代謝活性。
培養(yǎng)物污染是進行有效、可靠細胞培養(yǎng)的常見障礙之一。盡管某些污染物可通過對培養(yǎng)物進行仔細的顯微鏡檢查而檢測到,但諸如支原體等污染物無法通過視覺方法檢測。因此,應(yīng)使用能夠可靠檢測微生物污染物的試劑盒和試劑對培養(yǎng)物進行定期篩查。培養(yǎng)室需要使用能夠在污染出現(xiàn)時將其降低或消除的試劑,從而增強無菌技術(shù)并形成良好的培養(yǎng)室規(guī)范。
可測量細胞增殖和細胞活力的檢測常被用于監(jiān)測用各種刺激物處理后培養(yǎng)物中細胞的應(yīng)答和健康狀況。檢測方法的選擇取決于所要評估的細胞數(shù)、類型以及預(yù)期的結(jié)果。細胞增殖檢測可以監(jiān)測一段時間內(nèi)的細胞數(shù)、細胞分裂的次數(shù)、代謝活性或DNA合成。使用諸如臺盼藍或鈣黃綠素-AM等活性染料進行的細胞計數(shù)分析可以提供增殖率以及存活細胞的百分比。5(6)-羧基熒光素二乙酸酯N-琥珀酰亞胺酯(CFSE)是測量細胞群所經(jīng)歷的細胞分裂次數(shù)的常用方法。進入細胞后,CFSE會被細胞內(nèi)酯酶裂解形成熒光化合物,而琥珀酰亞胺基酯基會與細胞內(nèi)蛋白上的伯胺發(fā)生共價反應(yīng)。每次分裂后,每個子細胞的熒光強度都會減半,使得可以通過流式細胞儀而對細胞分裂的代數(shù)進行簡單的檢測。
我們用于測定細胞活力和增殖的全面工具和解決方案利用了多種方法,并包括:
DNA合成增殖檢測
代謝增殖檢測
發(fā)光細胞活力檢測
熒光染料增殖檢測
用于3D培養(yǎng)的活細胞/死細胞/總細胞三重染色
臺盼藍染料排除法活力計數(shù)
可測量代謝活性的檢測可適用于增殖、活力和細胞毒性的分析。四唑鹽(如MTT和XTT)至有色甲?化合物的還原反應(yīng),或刃天青的生物還原反應(yīng),僅發(fā)生在代謝活性細胞中?;钴S增殖的細胞會提高其代謝活性,而諸如暴露于毒素的受損細胞則會表現(xiàn)出活性的下降。
細胞死亡對于發(fā)育和體內(nèi)穩(wěn)態(tài)過程中的多種正常生理性功能是必需的。腫瘤細胞能夠逃避也被稱為凋亡的程序性細胞死亡,這種能力是大多數(shù)類型癌癥的標(biāo)志。多種細胞蛋白,包括細胞表面受體、接頭蛋白、蛋白酶和線粒體成分,可通過細胞凋亡而在細胞存活與死亡之間調(diào)節(jié)出一種良好的平衡。通過精心選擇檢測不僅能夠幫助分析細胞培養(yǎng)條件和處理條件對細胞健康的影響,還能用于分析它們對細胞健康影響的機制。我們可提供用于早期、中期和晚期凋亡檢測的全面檢測產(chǎn)品線。
維持無污染的細胞培養(yǎng)物是細胞研究的基礎(chǔ)條件。支原體污染是普遍的細胞培養(yǎng)問題之一,而支原體是一種形態(tài)特征為亞微米大小且不存在細胞壁的細菌,因此難以或無法通過顯微鏡檢出且對多種抗生素具有抗性。盡管支原體通常不會引起細胞死亡,但它們可對培養(yǎng)的細胞造成多種影響,包括代謝異常、增殖減慢和染色體畸變。簡而言之,支原體污染降低了相關(guān)細胞系的有效性,無法為生命科學(xué)研究提供有意義的數(shù)據(jù)。
我們用于支原體檢測和消除的工具包括:支原體檢測和消除
LookOut®支原體PCR檢測試劑盒,及其他用于可靠、靈敏檢測細胞培養(yǎng)物中支原體的PCR和qPCR試劑盒
用于通過支原體培養(yǎng)進行檢測的胰蛋白示磷酸鹽肉湯和其他試劑
用于通過熒光DNA染色法進行支原體檢測的DNA染料
用于支原體污染消除的LookOut®支原體消除噴霧和試劑