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單胺氧化酶(MAO)測試盒

簡要描述:單胺氧化酶(MAO)測試盒 單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-05-07
  • 訪  問  量:140

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

單胺氧化酶(MAO)測試盒

微量法100T/96S

注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無脊椎動(dòng)物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO活性異常導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂,從而引發(fā)多種病癥。

測定原理:

MAO催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化成酸;底物在360nm處有特征吸收峰,測定360nm光吸收下降的速率,計(jì)算MAO活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1管,4℃避光保存。

粗酶液提?。?/p>

  1. 稱取約0.1g樣品,加1 mL預(yù)冷的提取液一充分冰浴勻漿,1000g,4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心30min,棄上清;加入1mL預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的1mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測定)。

  2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心30min,棄上清;加入1.0 mL預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的1.0 mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測定),取上清置于冰上待測。

  3. 血清:直接測定。

測定操作表:

  1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至360nm。

  2. 操作表


對照管

測定管

酶液(µL)


20

試劑一(µL)

180

160

試劑二(µL)

20

20

混勻,于微量石英比色皿/96孔板,對照管調(diào)零,測定360nm處吸光值A(chǔ)1,然后37℃水浴60min,對照管調(diào)零,測定360nm處吸光值A(chǔ)2。ΔA=A1-A2

注意:空白管只需測定一次。

MAO活性計(jì)算公式:

a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

1、按蛋白含量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每毫克蛋白質(zhì)1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / mg prot)= ×V反總÷(V樣× Cpr)÷T= 114×ΔA÷Cpr

2、按樣本質(zhì)量計(jì)算:

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每克樣品1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 114×ΔA÷ W

3、按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每104個(gè)細(xì)胞1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / 104 cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T

= 114×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量

4、按照液體體積計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每升血清1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min /L)=×V反總÷V樣=114×ΔA

ε:底物摩爾消光系數(shù),1460L /mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;T:反應(yīng)時(shí)間,60min,W:樣本質(zhì)量,g

a.用96孔板測定的計(jì)算公式如下

1、按蛋白含量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每毫克蛋白質(zhì)1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / mg prot)= ×V反總÷(V樣× Cpr)÷T= 228×ΔA÷Cpr

2、按樣本質(zhì)量計(jì)算:

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每克樣品1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 228×ΔA÷ W

3、按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每104個(gè)細(xì)胞1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / 104 cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T

= 228×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量

  1. 按照液體體積計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每升血清1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min /L)=×V反總÷V樣=228000×ΔA

ε:底物摩爾消光系數(shù),1460L /mol /cm; d:96孔板光徑,0.5cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;T:反應(yīng)時(shí)間,60min,W:樣本質(zhì)量,g

注意事項(xiàng):

1、吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~0.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計(jì)算公式中參與計(jì)算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。

2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測定。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

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  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

單胺氧化酶(MAO)測試盒





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