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幾丁質(zhì)酶測試盒

簡要描述:幾丁質(zhì)酶測試盒 幾丁質(zhì)酶(Chitinase)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-05-06
  • 訪  問  量:171

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

幾丁質(zhì)酶測試盒 

微量法100T/48S

注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細(xì)胞壁中。而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

測定原理:

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,進(jìn)一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(土壤樣品專用)和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體105mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體5mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存。(若出現(xiàn)結(jié)晶,可80℃左右加熱溶解后使用)

試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。

試劑四:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。

粗酶液提?。?/p>

  1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

  2. 真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心20min,取上清置于冰上待測。

  3. 培養(yǎng)液:直接測定。

測定操作表:


對照管

測定管

粗酶液(µL)

80

80

提取液(µL)

120

40

試劑一(µL)


80

混勻,37℃水浴1h

試劑二(µL)

40

40

混勻,沸水浴7min,5000rpm,4℃,離心10min,取上清200µL。

試劑三(µL)

40

40

試劑四(µL)

80

80

混勻,37℃,15min,于微量石英比色皿/96孔板,測定A585,ΔA=A測定-A對照。

計(jì)算公式:

  1. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.3088-0.003,R2=0.9995

計(jì)算公式:

按照樣本重量計(jì)算

酶活性定義:37℃條件下,每克組織每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h/g鮮重)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×W) ÷T

=8.096×(ΔA +0.003)÷W

按照蛋白質(zhì)濃度計(jì)算

酶活定義:37℃條件下,每毫克蛋白每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h mg prot)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T           

= 8.096×(ΔA +0.003)÷Cpr

按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h /104 cell)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)

=8.096×(ΔA +0.003)÷細(xì)胞數(shù)量

4、按液體體積計(jì)算

酶活定義:37℃條件下,每毫升培養(yǎng)液每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h /mL)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷V樣=8.096×(ΔA +0.003)

V反總:反應(yīng)體系總體積,1mL;V樣:反應(yīng)體系中樣本體積,0.4mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

  1. 用96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.1544x-0.003,R2=0.9995

計(jì)算公式:

按照樣本重量計(jì)算

酶活性定義:37℃條件下,每克組織每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h/g鮮重)=(ΔA+0.003)÷0.1544×V反總÷(V樣÷V樣總×W) ÷T

=16.192×(ΔA +0.003)÷W

按照蛋白質(zhì)濃度計(jì)算

酶活定義:37℃條件下,每毫克蛋白每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h mg prot)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T           

= 16.192×(ΔA +0.003)÷Cpr

按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h /104 cell)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)

=16.192×(ΔA +0.003)÷細(xì)胞數(shù)量

4、按液體體積計(jì)算

酶活定義:37℃條件下,每毫升培養(yǎng)液每小時(shí)分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活單位。

幾丁質(zhì)酶活性(mg/h /mL)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷V樣=16.192×(ΔA +0.003)

V反總:反應(yīng)體系總體積,1mL;V樣:反應(yīng)體系中樣本體積,0.4mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

注意事項(xiàng):

  1. 反應(yīng)結(jié)束后立即進(jìn)行比色。

  2. 試劑四有一定的毒性,請操作時(shí)做好防護(hù)措施。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國外試劑的訂購??商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

幾丁質(zhì)酶測試盒 




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