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內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒

簡要描述:內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒 內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)活性測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2024-05-06
  • 訪  問  量:234

詳細介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

共價結(jié)合型果膠(CSP)含量測試盒

  微量法 100管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

Cx(EC3.2.1.4)存在于細菌、真菌和動物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。

測定原理:

采用3,5-二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀/可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體6mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體25mL×1瓶,4℃保存;

樣品測定的準(zhǔn)備: 

1、細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

  1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):

試劑名稱(μL)

測定管

對照管

  樣本

10

10

試劑一

100


蒸餾水


100

混勻,37℃準(zhǔn)確水浴2h

試劑二

200

200

混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,測540nm下吸光值A(chǔ),計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。

Cx活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。

2、血清(漿)Cx活力的計算

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷V樣÷T

=14.305×(ΔA+0.0673)

3、細胞、細菌和組織中Cx活力的計算

(1)按照蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min/mg prot)=[ [1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T

=14.305×(ΔA+0.0673) ÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min /104 cell)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T

=0.0286×(ΔA+0.0673)

1000:1mg/mL=1000ug/mL;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.11mL; V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,120 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 3.2039x - 0.0673;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。

2、血清(漿)Cx活力的計算

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷V樣÷T

=28.61×(ΔA+0.0673)

3、細胞、細菌和組織中Cx活力的計算

(1)按照蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min/mg prot)=[ [1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T

=28.61×(ΔA+0.0673) ÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

Cx活力(μg /min /104 cell)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T

=0.057×(ΔA+0.0673)

1000:1mg/mL=1000ug/mL;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.11mL; V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,120 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500萬。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國外試劑的訂購??商峁W美實驗室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價格。

內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒



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