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丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒,丙酮酸(pyruvic acid PA)含量測(cè)定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品

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  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-05-06
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詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒

丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。 

測(cè)定原理:

丙酮酸與2,4-二硝*苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝*苯腙,在堿性溶液中呈顯色。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體2.5mL×1瓶, 4℃保存; 

試劑二:液體12.5mL×1瓶, 4℃保存。

丙酮酸提?。?/p>

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),靜置30min, 8000g,25℃離心10min,取上清待測(cè)。

2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,靜置30min,8000g,25℃離心10min,取上清待測(cè)。

3、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,靜置30min, 8000g,25℃離心10min,取上清待測(cè)。

測(cè)定步驟:

  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至520nm,蒸餾水調(diào)零。

2、在微量石英比色皿或96孔板中加入75μL樣本和25μL試劑一,混勻,靜置2min,加入125μL試劑二,混勻,于520nm波長(zhǎng)處測(cè)定管吸光值A(chǔ)。

丙酮酸含量計(jì)算:

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 0.0466x + 0.0675; x為丙酮酸含量(µg/mL),y為吸光值。

2、按照血清(漿)體積計(jì)算

丙酮酸含量(μg/mL)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V3×V1÷V2)=214.6×(A-0.0675)

3、按照蛋白濃度計(jì)算

丙酮酸含量(μg/mg prot)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照樣品質(zhì)量計(jì)算

丙酮酸含量(µg/g鮮重)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2)=21.46×(A-0.0675) ÷W

3、按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

丙酮酸含量(μg/104 cell)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(500×V1÷V2)=0.043×(A-0.0675)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.075mL;V2:加入提取液體積,1 mL;V3:加入血清(漿)體積,0.1 mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 0.0233x + 0.0675; x為丙酮酸含量(µg/mL),y為吸光值。

2、按照血清(漿)體積計(jì)算

丙酮酸含量(μg/mL)= [(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷(V3×V1÷V2)=429.2×(A-0.0675)

3、按照蛋白濃度計(jì)算

丙酮酸含量(μg/mg prot)=[(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷(V1×Cpr)=42.92×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照樣品質(zhì)量計(jì)算

丙酮酸含量(µg/g鮮重)= [(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷(W ×V1÷V2)=42.92×(A-0.0675) ÷W

3、按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

丙酮酸含量(μg/104 cell)=[(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷(500×V1÷V2)=0.086×(A-0.0675)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.075mL;V2:加入提取液體積,1 mL;V3:加入血清(漿)體積,0.1 mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

注意:*低檢測(cè)限為1μg/mL或1μg/g鮮重或10ng/mg prot


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國(guó)外試劑的訂購(gòu)??商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購(gòu)方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

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  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國(guó)際與國(guó)內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒



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