銅螯合配體設(shè)計的最新進(jìn)展,例如作為穩(wěn)定Cu(I)氧化態(tài)的THPTA或BTTAA水溶液,提高銅催化的動力學(xué)疊氮-炔環(huán)加成(CuAAC)反應(yīng)和大大提高炔烴檢測的靈敏度。銅螯合
配體也顯示出增加生物相容性CuAAC反應(yīng)通過防止銅離子引起生物損害1。改進(jìn)CuAAC的下一步反應(yīng)是發(fā)展銅螯合疊氮化合物作為更多反應(yīng)底物。因為據(jù)推測疊氮化銅締合是CuAAC催化過程中的限速步驟環(huán)2,在疊氮化物上引入銅螯合部分報告分子可以顯著提高有效的Cu(I)在反應(yīng)部位的濃度,增強最弱環(huán)節(jié)中的反應(yīng)速率加速(圖2)。一直都是提出螯合疊氮化物的高反應(yīng)性來自銅-疊氮基的快速相互作用發(fā)生在形成乙炔化銅,這導(dǎo)致去質(zhì)子化炔烴在決定速率的步驟3。這一概念被成功地用于使用吡啶基進(jìn)行CuAAC反應(yīng)
銅螯合疊氮化物(吡啶甲基疊氮化物)作為基質(zhì)4-6。然而,吡啶甲基疊氮分子的銅螯合基序不是wan全,需要銅螯合劑(例如THPTA)的存在以實現(xiàn)CuAAC動力學(xué)的顯著改善反應(yīng)3,4。為了提高CuAAC反應(yīng)在復(fù)雜介質(zhì)中的性能,Click Chemistry Tools開發(fā)了新的螯合在其結(jié)構(gòu)中具有完整銅螯合系統(tǒng)的疊氮化物,稱為“疊氮化物Plus"(圖3)。這些疊氮化物能夠形成強的活性銅絡(luò)合物,因此被認(rèn)為是CuAAC反應(yīng)中的反應(yīng)物和催化劑。使用這些疊氮化物的類型,CuAAC反應(yīng)成為雙分子反應(yīng),并顯示出比CuAAC快得多的動力學(xué)用常規(guī)疊氮化物進(jìn)行的反應(yīng)。
使用瓊脂糖-炔烴樹脂標(biāo)記進(jìn)行CuAAC反應(yīng)的比較動力學(xué)測量(圖4)實驗(3.0毫米硫酸銅有(6.0 mM)或沒有THPTA配體)使用Cy5疊氮化物Plus、Cy5吡啶甲基疊氮化物和Cy5雙三唑疊氮化物–迄今為止報道的最快的銅螯合疊氮化物7。正如所料,吡啶甲基疊氮化物含有不wan全的銅螯合基序表現(xiàn)出相對較慢的反應(yīng)性,特別是在沒有THPTA存在的情況下。動力學(xué)數(shù)據(jù)顯示完成銅螯合部分大大增強了反應(yīng)性,并且重要的是不需要銅螯合部分的存在配體。有趣的是,由Click Chemistry Tools開發(fā)的銅螯合疊氮化物在CuAAC反應(yīng)與迄今為止報道的具活性的銅螯合疊氮化物的比較,雙三唑疊氮化物。
新的銅螯合疊氮化物可以形成疊氮化物-銅絡(luò)合物,該絡(luò)合物幾乎立即與炔烴反應(yīng)在稀釋條件下。CuAAC反應(yīng)中這種反應(yīng)性對低豐度的檢測具有特殊價值靶點,提高生物相容性,以及高度期望大大提高S/N比的任何其他應(yīng)用。
Click Chemistry Tools提供了一系列熒光疊氮化物Plus探針,包括AFDyes、Cy Dyes和經(jīng)典共軛染料至疊氮化物基團(tuán)。我們的AFDyes的光物理性質(zhì)與Alexa Fluor®染料可以匹配。疊氮化物加部分的特殊反應(yīng)性、AF染料的生物相容性和亮度使這些探針具有特殊的價值。不僅用于低豐度目標(biāo)的檢測,而且用于增加S/N比具有巨大價值的所有其他應(yīng)用。