品牌 其他品牌 貨號 PP-235 供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
jenabioscience:病毒RNA+DNA制備試劑盒-柱試劑盒 Viral RNA+DNA Preparation Kit - Column Kit ——從血液、血清、組織、細(xì)胞培養(yǎng)物或拭子中基于旋轉(zhuǎn)柱的RNA+DNA純化
Jena Bioscience由Max-Planck-Institute of Molecular Physiology(Dortmund)的一組科學(xué)家于1998年成立,利用超過25年的學(xué)術(shù)知識為100多個國家的研究和行業(yè)客戶開發(fā)創(chuàng)新試劑。
供一般實驗室使用。
運輸: 在環(huán)境溫度下裝運
儲存條件: 在環(huán)境溫度下儲存
保質(zhì)期: 12個月
描述: 病毒RNA+DNA制備試劑盒設(shè)計用于從各種病原體生物(如病毒或細(xì)菌)中快速有效地分離RNA和DNA。樣品可以是新鮮的或冷凍的血漿/血液(用除肝素以外的抗凝血劑處理)、血清、其他無細(xì)胞體液或病原體感染的組織。該試劑盒允許從鼻腔或咽喉拭子中高產(chǎn)量分離病毒RNA/DNA。 該試劑盒專門設(shè)計用于使用低洗脫體積分離高質(zhì)量核酸,并允許靈敏的下游分析,包括定量PCR和RT-PCR。純化的RNA/DNA不含蛋白質(zhì)和核酸酶。病毒RNA+DNA制備試劑盒使用包含離液鹽的裂解緩沖液來滅活RNA酶/DNA酶,并使用優(yōu)良的硅膠膜技術(shù)來快速純化完整的RNA/DNA。制備程序經(jīng)過優(yōu)化,可在30分鐘內(nèi)獲得可靠的結(jié)果。
內(nèi)容:
成分 PP-235S 50準(zhǔn)備套件 PP-235L 5 x 50預(yù)備套件 裂解緩沖液 15毫升 75毫升 乙醇(96-99 %) 加入15毫升乙醇 加入75毫升乙醇 洗滌緩沖液A 15毫升( 使用前加入15毫升乙醇) 75毫升( 使用前加入75毫升乙醇) 洗滌緩沖液B 6.2毫升( 使用前加入25毫升乙醇) 31毫升( 使用前加入125毫升乙醇) 洗脫緩沖液 3毫升 15毫升 旋轉(zhuǎn)柱和收集管 50個旋轉(zhuǎn)柱和收集管 5 x 50旋轉(zhuǎn)柱和收集管
所需的附加材料: 96-99 %乙醇 1.5毫升試管
準(zhǔn)備程序: DNA純化遵循細(xì)胞裂解、RNA/DNA結(jié)合、洗滌和洗脫程序。開始前,按照數(shù)據(jù)表和瓶子上的指示,向清洗緩沖液A和B中添加乙醇(96-99 %,不包括在試劑盒中)。請注意,洗滌緩沖液的乙醇濃度在長期儲存過程中可能會降低,導(dǎo)致最終DNA產(chǎn)量下降。 所提供的裂解緩沖液包含載體分子以增強(qiáng)RNA/DNA在柱膜上的結(jié)合。
1a從鼻腔或咽喉拭子制備
轉(zhuǎn)移250微升 裂解緩沖液
放進(jìn)微量離心管。 切下帶有收集的鼻或喉細(xì)胞的棉尖,并將其置于微量管中。 關(guān)閉試管并渦旋15秒。 在室溫(20-25°C)下孵育10分鐘。 取下棉簽,在試管邊緣將其擠出。 添加250微升 乙醇(96-99 %)
并通過輕輕渦旋充分混合。 1b從血漿、血清、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、無細(xì)胞液體或病毒感染組織中制備
將100 μl血漿、血清、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、無細(xì)胞液體或病毒感染組織轉(zhuǎn)移到1.5 ml微管中。 注意:較大體積(高達(dá)200 μl)的樣品可以很容易地放大,但可能需要更大的試管用于裂解程序。 添加250微升(或2.5倍樣品體積)的 裂解緩沖液.
渦旋15秒。 在室溫(20-25°C)下孵育10分鐘。 添加250微升(或2.5倍的樣品體積) 乙醇(96-99 %)
并通過輕輕渦旋充分混合。 2列裝載
放置a 旋轉(zhuǎn)柱
放入提供的2 ml收集管中。 旋轉(zhuǎn)溶解產(chǎn)物-乙醇混合物,并將溶液轉(zhuǎn)移到 旋轉(zhuǎn)柱.
蓋上蓋子,離心 旋轉(zhuǎn)柱
轉(zhuǎn)速為13,000轉(zhuǎn)/分鐘,持續(xù)1分鐘。 丟棄收集管中的流通液,并將色譜柱放回同一管中。 注意:色譜柱儲器的最大容量為800 μl。對于更大的樣品容量,丟棄中間的流通液并再次裝載旋轉(zhuǎn)色譜柱。 3柱清洗
添加500微升 洗滌緩沖液A(加入乙醇)
到 旋轉(zhuǎn)柱
并在13,000 rpm下離心1分鐘。 丟棄收集管中的流通液,并將旋轉(zhuǎn)柱放回同一管中。 添加500微升 洗滌緩沖液B(添加乙醇)
并以13,000 rpm離心1分鐘。 注意:在第一次使用清洗緩沖液B之前,按照瓶子上的指示添加乙醇。 丟棄收集管中的流通液,并將旋轉(zhuǎn)柱放回同一管中。 以13,000 rpm的速度離心1分鐘。 注意:干燥膜很重要,因為殘留的乙醇可能會干擾下游反應(yīng)。 4洗脫
放置 旋轉(zhuǎn)柱
放入新的1.5毫升微量試管(未提供)。 添加40-50微升 洗脫緩沖液
直接到旋轉(zhuǎn)柱的膜上。 注意:避免用移液管頭端 接觸薄膜。 室溫下孵育1分鐘。 以13,000 rpm的速度離心1分鐘。 使用2-5 μl洗脫的RNA和/或DNA作為PCR或RT-PCR檢測或進(jìn)一步下游應(yīng)用的模板。洗脫的RNA/DNA可以儲存在-70℃下
上海牧榮生物科技有限公司
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