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當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 實(shí)驗(yàn)試劑 > 其他試劑 > 21005C/K21005CMagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit

MagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit

簡(jiǎn)要描述:MagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit 貨號(hào):21005C/K21005C

  • 產(chǎn)品型號(hào):21005C/K21005C
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-08-22
  • 訪  問  量:106

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)21005C/K21005C
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

MagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit


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MagVigen鏈霉親和素磁性納米顆??梢云毡榻Y(jié)合任何生物素化的生物分子(例如抗體、蛋白質(zhì)、肽、DNA)。MagVigen鏈霉親和素-生物素-生物分子復(fù)合物可使用磁性架(目錄號(hào)A20006)與未結(jié)合的生物素-生物分子輕松分離。這提供了一種用磁性納米粒子標(biāo)記生物分子的快速而簡(jiǎn)潔的方法。純化的納米粒子-生物分子復(fù)合物可用于多種下游生物分離過程(例如蛋白質(zhì)純化、免疫沉淀、細(xì)胞分離或去除以及分子檢測(cè)。)

MagVigen鏈霉親和素理想地與小鼠抗體一起用于從獲自組織或器官的細(xì)胞群體混合物中分離細(xì)胞(例如CTCs、干細(xì)胞)。分離的細(xì)胞是活的,可以進(jìn)一步培養(yǎng)或用于下游分子分析,如mRNA分離和RT-PCR。使用MagVigen納米顆粒進(jìn)行細(xì)胞分離無需使用色譜柱,因此細(xì)胞不會(huì)因通過色譜柱基質(zhì)而受到機(jī)械應(yīng)力的影響。磁性分離的細(xì)胞高度純化,并保持其活力,是下游應(yīng)用的理想選擇。

MagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit

mag vigen–鏈霉親和素用于細(xì)胞富集的優(yōu)勢(shì)

  • 簡(jiǎn)單快速地制備納米顆粒-初級(jí)小鼠抗體綴合物
  • 簡(jiǎn)單溫和的細(xì)胞分離
  • 強(qiáng)而持久的熒光信號(hào)
  • 一致的高質(zhì)量結(jié)果
  • 高結(jié)合能力
  • 高生物相容性
  • 低非特異性結(jié)合

產(chǎn)品內(nèi)容

  • cat # 21005 c:MagVigen-鏈霉親和素在含0.02% NaN3和0.02% BSA的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中提供。pH 7.4。每個(gè)小瓶包含1毫升的溶液,其顆粒濃度為2毫克/毫升,這足以結(jié)合10個(gè)

    9

    細(xì)胞。
  • 納米粒子尺寸:使用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)量的200-500納米。
    多分散指數(shù) < 0.2.

    容量:50微克生物素抗體/毫升納米顆粒

Cat# K21005C還包括:

  • 洗滌緩沖液
  • 洗脫緩沖液

除磁鐵外的所有材料都應(yīng)儲(chǔ)存在4°c下。

保質(zhì)期:6個(gè)月

草案

細(xì)胞富集

該協(xié)議提供了濃縮10的一般指南5 -106使用MagVigen鏈霉親和素磁性納米顆粒的細(xì)胞。請(qǐng)根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整試劑的量。

  1. 使用前,輕輕渦旋或吸取小瓶中的MagVigen鏈霉親和素磁性納米顆粒。

  2. 等份20-50 μl納米粒子溶液用于富集實(shí)驗(yàn)。
  3. 注意: 20-50 μl通常足以富集105 -106細(xì)胞。細(xì)胞捕獲效率可受多種因素影響,例如細(xì)胞群體中靶細(xì)胞的頻率、細(xì)胞表面表達(dá)的抗原/表位的密度以及抗體親和力。相應(yīng)地調(diào)整納米顆粒的量。

  4. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒兩次。將磁鐵放在試管側(cè)面1-2分鐘,將納米顆粒從溶液中分離出來,并小心去除上清液(磁鐵仍在側(cè)面)。

  5. 向納米顆粒中加入1μg-2μg生物素偶聯(lián)的抗體(體積為100- 200 μl ),并在旋轉(zhuǎn)器上孵育30-60分鐘。
  6. 注意: 50 μl納米粒子可以結(jié)合約2μg抗體。

  7. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒-抗體綴合物兩次,以去除未結(jié)合的抗體。

  8. 將納米顆粒-抗體綴合物重新懸浮于洗滌緩沖液(50 μl)中,并將其添加至細(xì)胞樣品,總體積為0.1-0.5 ml。

  9. 在室溫下,將納米顆粒與細(xì)胞樣品在軌道振蕩器上孵育30分鐘。

  10. 孵育后,使用磁鐵將納米顆粒(與細(xì)胞結(jié)合)從溶液中分離出來,并小心去除上清液。

  11. 用500μl細(xì)胞培養(yǎng)基洗滌納米顆粒-細(xì)胞復(fù)合物兩次。

  12. 分離的細(xì)胞可以重新懸浮在細(xì)胞培養(yǎng)基中用于下游應(yīng)用。

注意: 洗脫緩沖液可用于從MagVigen鏈霉親和素磁性納米顆粒中洗脫目標(biāo)蛋白質(zhì)或細(xì)胞。

MagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit

免疫沉淀

MagVigen納米顆??赏ㄟ^免疫沉淀分析鑒定新的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,其中MagVigen鏈霉親和素生物素-抗體復(fù)合物可用于從分析樣品(如細(xì)胞裂解物)中分離特定的目標(biāo)蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合物。免疫沉淀的蛋白質(zhì)可以通過電泳、蛋白質(zhì)染色和質(zhì)譜進(jìn)一步分析。MagVigen納米顆粒比傳統(tǒng)微珠小得多。這一特征使得納米顆粒更容易接近抗原表位,并且對(duì)蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)復(fù)合物的天然功能干擾更少。此外,MagVigen納米顆粒的表面經(jīng)過涂層處理,可減少與細(xì)胞蛋白質(zhì)和其他生物分子的非特異性相互作用。該特征允許更具體地“下拉"真實(shí)蛋白質(zhì)復(fù)合物靶。

MagVigen™ Streptavidin Conjugates Kit

納米粒子清洗

為了獲得納米顆粒的最佳結(jié)果,建議在添加到樣品之前清洗納米顆粒。

  1. 渦旋MagVigen納米顆粒10-20秒。

  2. 取50μl納米粒子溶液,加入到100μl 1X洗滌緩沖液中,渦旋混合。

  3. 將磁鐵放在試管側(cè)面2-5分鐘,將納米顆粒從溶液中分離出來,并小心除去上清液(磁鐵仍在側(cè)面)。
  4. 注意: 在微量離心管的側(cè)面應(yīng)該可以看到含有深棕色納米顆粒的透明沉淀物。

  5. 清洗納米顆粒2次。

免疫沉淀

  1. 向含有細(xì)胞裂解物的試管中加入2 μg生物素抗體(或按照公司方案推薦的量)。

  2. 在冰上孵育一小時(shí)。

  3. 向試管中加入50μl預(yù)洗的MagVigen納米顆粒。在4°c下旋轉(zhuǎn)2小時(shí)

  4. 用磁鐵將納米顆粒從樣品溶液(細(xì)胞裂解物)中分離出來。去除上清液。

  5. 用所用的50μl裂解緩沖液洗滌納米顆粒3次。

  6. 最后一次清洗后,去除上清液,并向珠子中加入100μl洗脫緩沖液。

  7. 渦旋并孵育5分鐘。

  8. 從溶液中磁性分離納米粒子。收集上清液,同時(shí)避免干擾珠粒。目標(biāo)蛋白質(zhì)存在于上清液中,準(zhǔn)備進(jìn)行分析。

外來體隔離

  1. 使用前,輕輕渦旋或吸取小瓶中的MagVigen鏈霉親和素磁性納米顆粒。

  2. 等份50 μl納米粒子溶液用于富集實(shí)驗(yàn)。
  3. 注意: 50 μl通常足以富集1-10×105外來體。外來體捕獲效率可受多種因素影響,例如樣品中外來體的頻率、外來體表面表達(dá)的抗原/表位的密度以及抗體親和力。相應(yīng)地調(diào)整納米顆粒的量。

  4. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒兩次。將磁鐵放在試管側(cè)面1-2分鐘,將納米顆粒從溶液中分離出來,并小心去除上清液(磁鐵仍在側(cè)面)。

  5. 向納米顆粒中加入500 ng生物素偶聯(lián)的抗體(體積為100-200 μl ),并在旋轉(zhuǎn)器上孵育30-60分鐘。
  6. 注意: 50 μl納米顆??梢越Y(jié)合約200 ng的抗體。

  7. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒-抗體綴合物兩次,以去除未結(jié)合的抗體。

  8. 將納米顆粒-抗體綴合物重新懸浮于洗滌緩沖液(50 μl)中,并將其添加至細(xì)胞樣品,總體積為0.1-0.5 ml。

  9. 在2°C±8°C的溫度下,將納米顆粒與預(yù)富集的外來體樣品在軌道振蕩器上孵育2小時(shí)或過夜

  10. 孵育后,用磁鐵將納米顆粒(結(jié)合有外來體)從溶液中分離出來,小心除去上清液。

  11. 用500μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒-外來體復(fù)合物。

  12. 外來體結(jié)合的納米顆粒現(xiàn)在準(zhǔn)備用于外來體裂解、凝膠電泳和蛋白質(zhì)分析。



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