簡要描述:山梨醇含量測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。
詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
山梨醇含量測試盒
微量法 100管/96樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
山梨醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是糖運輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測山梨醇含量變化。
測定原理:
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物,在655nm波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體3.5mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體3.5mL×1瓶 ,4℃保存。
山梨醇的提?。?/p>
按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水),研磨成勻漿,95℃水浴10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液待測。
測定步驟
分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至655nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):
試劑(μL) | 空白管 | 測定管 |
試劑一 | 35 | 35 |
試劑二 | 35 | 35 |
樣本 | 230 | |
蒸餾水 | 230 |
混勻后室溫靜置15min,8000g,25℃離心10min,取200μL上清液至微量石英比色皿或96孔板中,測655nm下吸光值A(chǔ),計算ΔA=A測定管-A空白管。空白管只要做一管。
山梨醇含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.352x - 0.002;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按照樣品質(zhì)量計算
山梨醇含量(mg /g 鮮重)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=2.84×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計算
山梨醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入樣本體積,0.23mL;V2:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.176x - 0.002;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按照樣品質(zhì)量計算
山梨醇含量(mg /g 鮮重)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計算
山梨醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(V1×Cpr)=5.68×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入樣本體積,0.23mL;V2:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g
注意:*低檢測限為1μg/g鮮重或0.01μg /mg prot
上海牧榮生物科技有限公司
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