簡要描述:原果膠含量測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務。
詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
原果膠含量測試盒
微量法100T/48S
注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
果膠是植物細胞壁主要組成成分之一,分為水溶性果膠和不溶性果膠,即原果膠。因其具有良好的乳化、增稠和凝膠作用,在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領域具有較廣泛的應用。
測定原理
原果膠在稀酸中水解為可溶性果膠,并進一步轉化為半乳糖醛酸,產(chǎn)物在強酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物,在530 nm處有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
天平、研缽、常溫離心機、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體100mL×2瓶,4℃保存。
提取液二:液體100mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體1mL×1支,4℃保存。
試劑一:濃硫酸,自備。
試劑二:液體2mL×1支,4℃保存。
試劑三:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
將組織樣品搗碎,按照樣品質量(g)和提取液一體積(mL)為1: 20的比列(建議取約0.05g樣品,加入1mL提取液一),置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min,取出冷卻后于5000g、 25℃離心10min,去掉上清,沉淀中再加入1mL提取液一重復操作一次,離心后去上清,沉淀中加入1mL提取液二,置于90℃恒溫水浴鍋中水解1h,取出冷卻后于8000g、25℃離心15min,取上清液待測。
測定操作表
空白管 | 標準管 | 對照管 | 測定管 | |||||
樣本(μL) | 30 | 30 | ||||||
標準品(μL) | 30 | |||||||
濃硫酸(μL) | 180 | 180 | 180 | 180 | ||||
混勻、90℃水浴10min,取出后冷卻 | ||||||||
試劑二(μL) | 30 | |||||||
試劑三(μL) | 30 | 30 | 30 | |||||
混勻,25℃靜置30min | ||||||||
蒸餾水(μL) | 90 | 60 | 60 | 60 | ||||
充分混勻,取200μL置于微量石英比色皿/96孔板中,測定530nm處吸光值,分別記為A1、A2、A3和A4。△A1=A2-A1,△A2=A4-A3 |
注意:空白管和標準管只需測定一次。
計算公式
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
原果膠含量(mg /g 鮮重)= (C標準×V標) ×△A2÷△A1÷(W÷V樣總) = 0.25×△A2÷△A1÷W
C標準:標準品濃度,0.25mg/mL;V標:反應體系中加入標準品體積,0.02mL; V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本鮮重,g。
用96孔板測定的計算公式如下
原果膠含量(mg /g 鮮重)= (C標準×V標) ×△A2÷△A1÷(W÷V樣總) =0.25×△A2÷△A1÷W
C標準:標準品濃度,0.25mg/mL;V標:反應體系中加入標準品體積,0.02mL; V樣總:加入提取液體積,1mL; W:樣本鮮重,g。
注意事項
濃硫酸具有強腐蝕性,操作時需特別注意,90℃加熱取出后冷卻再打開蓋子,以防液體飛濺燒傷。 若吸光值超過1,可將樣本提取液進行適當稀釋再進行測定,并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
*低檢出限為10μg/g。
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