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ATP含量試劑盒

簡要描述:ATP含量試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-04-26
  • 訪  問  量:242

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

ATP含量試劑盒


ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。

測定原理:

肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。

自備儀器和用品:

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

試劑組成和配制:

酸性提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;

堿性提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:粉劑×1支,4℃保存;臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

試劑二:液體1.5mL×1支,4℃保存;

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入500μL蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存;

試劑五:液體25mL×1瓶,4℃保存;

標(biāo)準(zhǔn)液:液體10mL×1瓶,2μmol/mLATP標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存;

 ATP提取

1、血清(漿)中ATP的提取:按照血清(漿)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議取約0.1mL血清(漿),加入1mL酸性提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,8000g 4 ℃離心10min;取上清液至另一EP管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,8000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(不可用于蛋白質(zhì)含量測定)。

2、組織中ATP的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL酸性提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清至另一EP管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,8000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(不可用于蛋白質(zhì)含量測定)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中ATP的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL酸性提取液),超聲波破碎1min(冰浴,強(qiáng)度20%或200W,超聲2s,停1s),8000g 4 ℃離心10min;取上清液至另一EP管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,8000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(不可用于蛋白質(zhì)含量測定)。

測定步驟:

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到700nm,蒸餾水調(diào)零。

2、顯色劑的配制:臨用前請(qǐng)根據(jù)擬用顯色劑體積(樣本數(shù)×0.2 m L),按試劑四(mL):試劑五(mL)=1:5的比例配制。用多少配多少。

 

3、樣本測定:

試劑名稱(μL)

測定管

對(duì)照管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣本

10

10



標(biāo)準(zhǔn)液



10

10

試劑一

20


20


試劑二

10

10

10

10

試劑三

10


10


蒸餾水


30


30

充分混勻,37℃準(zhǔn)確水浴30min

顯色劑

200

200

200

200




37℃水浴20min后,700nm下測定各管吸光值

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管通常只需要各做一個(gè)。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

ATP含量計(jì)算:

1、血清(漿)中ATP含量計(jì)算

ATP含量(μmol/mL)=[C標(biāo)準(zhǔn)管×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=40×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中ATP含量計(jì)算

(1)按蛋白濃度計(jì)算

ATP含量(μmol/mg prot)=[C標(biāo)準(zhǔn)管×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ×V1]÷(V1÷Cpr)=2×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

蛋白質(zhì)含量需要另外測定。

(2)按樣本鮮重計(jì)算

ATP含量(μmol/g鮮重)=[C標(biāo)準(zhǔn)管×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=4×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

ATP含量(μmol/104 cell)=[C標(biāo)準(zhǔn)管×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.008×(A測定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)液濃度,2μmol/mL;V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.01mL;V2:加入提取液體積,2mL;V3:加入血清(漿)體積:0.1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL; W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬。

注意:*低檢測限為10nmol/mL或10nmol/g鮮重或0.1nmol/mg prot


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國外試劑的訂購??商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

ATP含量試劑盒

















































































































  • 中文名稱:甲泛葡胺

  • 英文名稱:Metrizamide


分子式:C18H22I3N3O8

分子量:789.1

  • CAS號(hào):31112-62-6

    級(jí)別:Reagent Grade

  • EINECS編號(hào):250-475-5

  • 儲(chǔ)存條件:2~8℃

  • 中文別名:甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影

  • 英文別名:2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco

  • 是否危險(xiǎn):否





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  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide







































































































































































































































































































































































































































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