ludger  2-AB 聚糖標記試劑盒   產(chǎn)品代碼：LT-KAB-A2

2-AB（2-氨基苯甲酰胺）是糖基化分析中使用廣泛的熒光標記之一。 LudgerTag 2-AB 標記試劑盒包含標記多達 24 個聚糖樣品所需的所有試劑。

有兩種套件可供選擇，其所提供的還原劑類型有所不同：氰基硼qing化na或無毒的 2-甲基吡啶硼*。

部件號 還原劑
LT-KAB-A2 氰基硼qing化鈉 – 24 個樣品
LT-KAB-VP24 2-甲基吡啶*烷 – 24 個樣品

用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 標記游離聚糖。氰基*氫hua鈉還原劑。套件足以容納 24 個樣品。

產(chǎn)品規(guī)格

應用：用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 標記游離聚糖。

描述：該試劑盒包含通過還原胺化反應將染料綴合至聚糖的游離還原端的試劑。

傳統(tǒng)的 2-AA 和 2-AB 標記試劑盒在聚糖標記過程中使用氰基硼氫hua鈉作為還原劑。該試劑有毒，因此在操作過程中應使用通風柜。為了符合新興的健康和安全法規(guī)，我們現(xiàn)在將其替換為新的 VP 聚糖套件，該套件使用甲基吡啶*烷，這是一種明顯更安全的還原劑。

2-AB 標記試劑盒包含兩套以下試劑（每套 15 個樣品），裝在玻璃安瓿中，在純氮氣下密封：

LT-KAB-A2
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲亞砜 (DMSO)乙酸...

LT-KAB-VP24
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲基亞砜 (DMSO) / 乙酸溶液
2-甲基吡啶硼*

樣品數(shù)量一個 2-AB 標記套件包含可標記多達 30 個獨立分析樣品的試劑

HPLC 測定染料純度>99%

分子量137

Lambda-Ex 250 nm

Λ-Em 428 nm

樣品量每個樣品含有 25 pmol 至 25 nmol 聚糖。

合適的樣品任何具有游離還原末端的純化聚糖都可以被標記。

結(jié)構(gòu)完整性未檢測到（< 2 摩爾%）唾液酸、巖藻糖、硫酸鹽或磷酸鹽的損失。

標記效率通常 > 85 %（取決于樣品）。

標記選擇性本質(zhì)上是化學計量標記。

方案
1. 純化聚糖：LudgerClean EB10 柱 (LC-EB10-A6) 設(shè)計用于從蛋白質(zhì)、鹽和洗滌劑中純化聚糖。

2. 將樣品轉(zhuǎn)移到反應瓶中：對于從典型糖蛋白獲得的聚糖庫，樣品量應在 100 皮摩爾 – 50 納摩爾范圍內(nèi)。使用單個純聚糖，只需 5 皮摩爾即可在后續(xù) HPLC 分析中進行標記和檢測。合適的反應瓶包括小型聚丙烯微量離心管和用于 PCR 工作的管。

3. 干燥樣品：如果樣品體積超過10 μL，則干燥樣品。
如果樣品需要干燥，則應使用離心蒸發(fā)器來完成。如果不可能，則可以謹慎使用冷凍干燥（凍干）（特別是確保樣品在小瓶底部干燥成小而致密的物質(zhì)）。請勿將樣品置于高溫 (>28°C) 或一定 pH 條件下，因為這些條件會導致酸催化的唾液酸損失（高溫、低 pH 值）或聚糖還原末端的差向異構(gòu)化（高 pH 值）。
樣品干燥后，將聚糖重新溶解在 10 μL 水中。

4.（僅限 LT-KAB-A2）制備 DMSO-乙酸混合物：將 150 μL 冰乙酸添加到 DMSO 瓶中，并通過移液器動作混合。

5. 添加染料：將 DMSO-乙酸混合物添加到裝有 2-AB（2-氨基苯甲酰胺酸）染料的小瓶中，并混合直至染料溶解。

6. 添加還原劑：將溶解的染料添加到裝有氰基硼氫hua鈉或甲基吡啶甲硼*的小瓶中，并通過移液器動作混合直至還原劑全溶解，制成最終的標記試劑。

7. 將標記試劑添加到樣品中：將標記試劑添加到每個干燥的聚糖樣品中，蓋上微管，充分混合。

8. 孵育：將反應瓶放入加熱塊、沙盤或設(shè)定為 65°C 的干燥箱中，孵育 3 小時。在大多數(shù)情況下，孵育時間可以縮短至 2 小時或延長至 4 小時，而不會顯著改變標記反應的結(jié)果。

9. 離心并冷卻：孵育期結(jié)束后取出樣品，短暫離心微管，然后讓其冷卻至室溫。

10. 樣品清理：建議進行標記后樣品清理，以去除多余的染料和其他標記試劑。

Ludger 提供全系列的產(chǎn)品和耗材，用于使用液相色譜 (LC)、質(zhì)譜 (MS)、LC-MS 或毛細管電泳 (CE) 等分析平臺進行糖基化樣品制備、表征和分析。這包括用于釋放和標記單糖或唾液酸的試劑盒、N-或O-聚糖標記試劑盒以及聚糖清理/純化和富集系統(tǒng)。我們還提供系統(tǒng)適用性標準品、定性和定量控制、高效液相色譜 (HPLC) 和超高效液相色譜 (uHPLC) 色譜柱和緩沖液，為您的所有聚糖分析需求提供一站式服務！

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