谷胱甘肽(GSH,g-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸)是需氧生物體中主要的非蛋白質巰基,在大多數細胞中合成。普遍存在的三肽是由谷氨酸和半胱氨酸在 g-谷氨酰半胱氨酰合成酶的催化下結合形成的。然后通過谷胱甘肽合成酶添加甘氨酸以形成 GSH。 除了在氫過氧化物還原為相應的醇(或過氧化氫的情況下為水)的過程中提供電子外,GSH 還在谷胱甘肽 S-轉移酶催化的異生物質代謝中充當共底物。它也是幾種參與細胞內運輸的代謝酶的輔助因子,具有抗氧化劑和輻射防護劑的作用,并促進蛋白質折疊和降解。
測試原理
NWLSS™ 谷胱甘肽測定是 Tietze 描述的方法的改進。通用硫醇試劑5-5'-二硫代雙[2-硝基苯甲酸](DTNB,埃爾曼試劑)與GSH反應形成412 nm發(fā)色團5-硫代硝基苯甲酸(TNB)和GS-TNB。隨后 GS-TNB 被谷胱甘肽還原酶和 β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADPH) 還原,釋放出第二個 TMB 分子并回收 GSH;從而放大響應。最初存在于反應混合物中或由 GSH 與 GS-TNB 的混合二硫化物反應形成的任何 GSSG 會迅速還原為 GSH,并在測定中可檢測到。
一種基于速率的動力學測定法,用于定量各種樣品(包括血液、血漿、組織和培養(yǎng)細胞)中的還原型谷胱甘肽 (GSH) 和氧化型總谷胱甘肽 (GSH)。該試劑盒還適用于清除還原型谷胱甘肽后測量氧化型谷胱甘肽 (GSSG)。
NWLSS™ 谷胱甘肽 (GSH GSSG) 檢測的優(yōu)點:
出色的靈敏度低至 5 pMol
當樣品用合適的硫醇清除劑(例如 4乙烯基吡啶 (4VP) 或 NEM)預處理時,可以檢測谷胱甘肽二硫化物 (GSSG)
目錄編號: | NWK-GSH01 |
格式: | 192 項測試以 2 X 96 孔微量滴定板檢測形式呈現(xiàn)。還提供用于分光光度計的比色皿格式。 |
樣品要求: | 全血、血漿、組織和細胞裂解物。 |
特異性: | 總谷胱甘肽(GSH 加 GSSG) |
靈敏度: | 使用標準方法為 0.1 µM(適用于全血和某些組織類型)。使用改良的高靈敏度方法為 0.005 µM(適用于血漿中 GSH 水平較低的樣品,或用于清除還原的 GSH 后檢測 GSSG)。聯(lián)系 NWLSS 了解詳情。 |
有可能的使用: | 總 GSH 的定量測量(還原型加氧化形式) |
儲存和穩(wěn)定性: | 如果儲存在 2-8C 下,自生產之日起 12 個月 |
套件內容: | DTNB 試劑 NADPH NADPH 稀釋劑 GR 酶 GSH (GSSG) 校準劑 測定 緩沖液 |
僅供研究使用