該檢測(cè)試劑盒包含用于常規(guī)檢測(cè)蘇?;钚缘脑噭?。包含蘇酰化標(biāo)記(人拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 蛋白),以便清晰地檢測(cè)反應(yīng)。該測(cè)定已被證明適用于粗提物。強(qiáng)烈建議人 EI,活性 (Cat# P001;P006)、人 E II,活性 (Cat# P002;P011) 和人 SUMO I,活性 (Cat# P003;P012) 與該試劑盒一起使用。
K007 套件包含:
SAE I 和 SAE II(人類 EI)(目錄號(hào) P006)
UBC9(人類 E II)(目錄號(hào) P011)
SUMO I(主動(dòng)形式)。 (目錄號(hào) P012)
人類 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 片段。 (目錄號(hào) B007)
抗拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 抗體。 (目錄號(hào) AP006)(凍干抗體應(yīng)在使用前用 100 ul H 2 O 復(fù)溶。)
10X 蘇?;磻?yīng)緩沖液。 (目錄號(hào) B006)(10x 緩沖液含有 200 mM Hepes pH 7.5、50 mM MgCl 2和 20 mM ATP。)
上述試劑適用于50次蘇?;磻?yīng)。
測(cè)定條件:
蘇?;瘻y(cè)定在含有20mM Hepes pH 7.5、5mM MgCl 2、2mM ATP的反應(yīng)緩沖液中以20ul的終體積進(jìn)行。我們建議添加新鮮的 2mM ATP 以確保提供足夠的能量。
拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 蘇?;刂品桨福?/strong>
添加 2 ul 50 kd 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 片段(目錄號(hào) B007)作為每個(gè)反應(yīng)的底物。
在每個(gè)反應(yīng)中,首先將 2 ul E2 添加到底物中,然后添加 2 ul Sumo-1、2ul 10x 反應(yīng)緩沖液(目錄號(hào) B006)、2ul E1 和 2 ul 20 mM ATP。最后,添加 H 2 O 使總體積達(dá)到 20 ul 。
LAE SUMO化蛋白的最佳反應(yīng)濃度如下: 對(duì)照測(cè)定的推薦條件是37 ℃,30~60分鐘。
EI:7.5微克/毫升
E II:50微克/毫升
SUMO-1:50微克/毫升
使用 10 ml 中提供的拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 抗體(目錄號(hào) AP006)稀釋 1000 倍進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡。應(yīng)檢測(cè)四個(gè)主要的SUMO化條帶。
使用 Topo-I 抗體(目錄號(hào) AP006)對(duì)蘇酰化 50 Kd Topo-I 蛋白(目錄號(hào) B007)進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡(12.5% 凝膠)。泳道 1:sumoylated 50Kd Topo-I 片段;泳道 2:未蘇?;?50Kd Topo-I 片段。
Topo-I 抗體 ( Cat#AP006)可以檢測(cè)到至少四個(gè)主要的蘇?;?Topo-I 片段 。
蘇?;桨福?/span>
準(zhǔn)備合適的純化底物蛋白。
在每個(gè)反應(yīng)中,首先將 2 ul E2 添加到底物中,然后添加 2 ul Sumo-1、2 ul 10 x 反應(yīng)緩沖液、2 ul E1 和 2 ul 20 mM ATP。最后,添加 H 2 O 使最終體積達(dá)到 20 ul。
LAE蛋白的最佳反應(yīng)濃度如下:
EI:7.5微克/毫升
E II:50微克/毫升
SUMO-1:50微克/毫升
運(yùn)輸/儲(chǔ)存:
該套件隨干冰一起運(yùn)輸,應(yīng)儲(chǔ)存在 -70 o C 或更低的溫度下。
法律考慮:僅供研究使用。
LAE BIO是一家有前途的生物技術(shù)公司,致力于制造和開發(fā)最高質(zhì)量的 研究抗體和純化蛋白質(zhì)。我們創(chuàng)新的 線性陣列表位 (LAE) 技術(shù) 與眾不同我們來(lái)自所有其他抗體制造商。這項(xiàng)新技術(shù)結(jié)合了受體介導(dǎo)的攝取和有效的抗原呈遞,以誘導(dǎo)免疫反應(yīng),產(chǎn)生針對(duì)任何抗原(包括自身抗原)的抗體。先進(jìn)技術(shù)與多年的抗原制備和蛋白質(zhì)純化經(jīng)驗(yàn)相結(jié)合,確保我們以實(shí)惠的價(jià)格提供優(yōu)質(zhì)的抗體和蛋白質(zhì)。
我們專注于新型親和純化蛋白和參與 體外蘇?;钚詸z測(cè)的高度特異性抗體。我們可以為您提供全套蘇?;鞍祝?/span>SAEI/SAEII、UBC9、SUMO-1、SUMO-3,以便立即開始您的蘇?;瘷z測(cè)。 為了篩選針對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶的抗腫瘤藥物,我們提供人類 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I、II a和 II b及其抗體。這些試劑包括 TOPO I、TOPO II a、TOPO II b、TOPO I Antibody F14、TOPO I Antibody T8N、TOPO I Assay Kit、TOPO I 藥物篩選試劑盒、TOPO II a 抗體和 TOPO II b 抗體。我們還提供蛋白激酶 A 催化亞基、DARPP-32、Phospho-DARPP-32、磷酸酶抑制劑-1、磷酸酶抑制劑-1、磷酸酶抑制劑-2、磷酸酶抑制劑-2 Ab,供您研究多巴胺能功能腦。