什么是 D-熒光素?
更新時(shí)間:2023-12-13 點(diǎn)擊次數(shù):505
D-熒光素是產(chǎn)生生物發(fā)光或光的熒光素酶的小分子底物。自然界中或通過化學(xué)合成產(chǎn)生的熒光素和類似物有多種類型。底物和酶存在于多種發(fā)光生物體中,包括螢火蟲和甲蟲。螢火蟲熒光素與甲蟲熒光素相同。
熒光素?zé)晒馑孛赶到y(tǒng)如何工作? D-熒光素的氧化可以產(chǎn)生光,但在沒有酶和輔因子 ATP 的情況下,反應(yīng)速度極慢。該酶催化其底物的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生光。另一種手性形式,L-熒光素,競爭性地抑制化學(xué)反應(yīng)。
D-熒光素有什么用途?發(fā)光計(jì)和光學(xué)顯微鏡已被開發(fā)用于檢測兩步熒光素酶催化化學(xué)反應(yīng)發(fā)出的光。熒光素酶蛋白可以在細(xì)胞和動物(主要是小鼠)中瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)。隨著熒光素?zé)晒馑孛窤TP試劑、設(shè)備和基因工程的發(fā)展,螢火蟲熒光素酶和熒光素已廣泛應(yīng)用于體外和體內(nèi)報(bào)告基因檢測,檢測基因表達(dá)以及在細(xì)胞活力檢測或激酶活性檢測中檢測細(xì)胞ATP水平。熒光素?zé)晒馑孛?ATP 檢測試劑盒可市售。螢火蟲熒光素酶和 D-熒光素的應(yīng)用(包括體內(nèi)成像)仍在擴(kuò)大。
如何制備D-熒光素鉀鹽?盡管 D-熒光素是螢火蟲和甲蟲中產(chǎn)生的天然化合物,但化學(xué)合成的成本比從昆蟲中提取生物合成化學(xué)物質(zhì)便宜得多。市場上有D-熒光素游離酸、D-熒光素鉀鹽、D-熒光素鈉鹽。我們的合成 D-熒光素鉀鹽(目錄號 MB000102-R70170 或 MB102)經(jīng)過純化,可去除脫氫熒光素和 L-熒光素(螢火蟲熒光素酶的競爭性抑制劑)。該化學(xué)品的水溶性很大,可制成高濃度的儲備液。