質(zhì)量和來源: 選擇高質(zhì)量的胎牛血清供應(yīng)商,并確保其符合國際標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制要求。了解胎牛血清的來源和處理方式,以確保其質(zhì)量和純度。
批次一致性:由于不同批次的胎牛血清存在差異,建議在實(shí)驗(yàn)中盡量使用同一批次的血清,以減少結(jié)果的變異性。
儲存和解凍: 通常情況下,胎牛血清應(yīng)-20°C以下冷凍保存。并避免多次凍融循環(huán),因?yàn)檫@可能會降低其效力。解凍時,將冷凍血清先置于4°C冰箱中融解,然后再移入室溫。在解凍過程中可均勻搖晃,使溫度與成份均一,減少沉淀的發(fā)生。
滅活處理: 56°C加熱可滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時推薦熱滅活血清。
稀釋和添加量: 根據(jù)特定實(shí)驗(yàn)的要求,適當(dāng)稀釋胎牛血清,并將其加入培養(yǎng)基中。建議在初期實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行不同濃度的試驗(yàn),以確定適合特定細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡难鍧舛?/p>
組內(nèi)控制: 如果實(shí)驗(yàn)中涉及多個樣品或組的比較,建議在每個組中使用相同濃度的胎牛血清,并確保實(shí)驗(yàn)條件的一致性,以排除血清差異對結(jié)果的影響。
細(xì)胞特異性:不同類型的細(xì)胞對胎牛血清的需求可能不同。一些細(xì)胞可能對胎牛血清中的成分敏感,而其他細(xì)胞則可能對其他批次的血清更適應(yīng)。因此,在選擇培養(yǎng)基和血清時,要考慮特定細(xì)胞類型的要求。