BAPtofect®?-25 試劑盒是 25 nm 構(gòu)象鎖定的 BAPC,用量為 0.5mg、1.0mg、5mg 和 10mg,用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染研究。 25 nm BAPC®? 已被證明是實(shí)現(xiàn)最大細(xì)胞轉(zhuǎn)染率的理想尺寸。
與目前可用的脂質(zhì)體和聚合物基細(xì)胞轉(zhuǎn)染材料相比,BAPC ®? 為細(xì)胞轉(zhuǎn)染研究提供了一種改進(jìn)的選擇。在使用 HeLa 和 HEK-293 細(xì)胞的研究中,與行業(yè)脂質(zhì)體載體相比,BAPtofect®?-25 產(chǎn)生的轉(zhuǎn)染率超過(guò)了陽(yáng)離子脂質(zhì),而且細(xì)胞毒性要低得多。BAPC®? 通過(guò)內(nèi)體途徑進(jìn)入細(xì)胞,提供有針對(duì)性的、受保護(hù)的有效載荷遞送。表面結(jié)合的蛋白質(zhì)和核酸都免受裂解降解。
+25 至 30 毫伏
1.種子細(xì)胞,使得它們?cè)谵D(zhuǎn)染時(shí)60-80%融合*
2.取出培養(yǎng)基并用Dulbecco磷酸鹽緩沖鹽水洗滌細(xì)胞。
3.在轉(zhuǎn)染前,加入Opti-MEM培養(yǎng)基并在CO2培養(yǎng)箱中放置幾分鐘。
4.轉(zhuǎn)染復(fù)合物的制備:
a) 稀釋BAPtoect™-25,帶有Opti-MEM介質(zhì)。
b) 在單獨(dú)的試管中,將核酸(pDNA/mRNA)與Opti-MEM混合。
c) 慢慢加入稀釋后的BAP™-25至含有Opti-MEM的核酸
(pDNA/mRNA)。
d) 在室溫下靜置15-30分鐘**。
5.添加核酸-BAPtofect™-25復(fù)合物與Opti-MEM培養(yǎng)基中的細(xì)胞結(jié)合。
6.培養(yǎng)2-6小時(shí),然后用血清生長(zhǎng)培養(yǎng)基代替。
7.在分析之前,培養(yǎng)至所需的終點(diǎn)。